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2020年11月26日/医麦客新闻 eMedClub News/--11月17日和11月24日，医麦客携手全球科学服务的领导者Thermo Fisher Scientific（赛默飞世尔科技）在医麦客直播平台准时上线了两场“赛默飞mRNA疫苗研发系列公开课”，共吸引超过900名观众驻足围观。
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11月24日晚8点，系列公开课第二场准时上线，赛默飞生命科学事业部蛋白与细胞分析技术专家马骏以“稳健前行，疫苗研发关键——mRNA疫苗安全性及免疫效力评价”为主题带来了精彩的课程分享，并在线为行业同仁解答相关疑惑。
第二场系列公开课精彩回顾
马骏老师的讲座内容主要包括：
? mRNA疫苗的基本现状及发展前景；? mRNA疫苗的基本开发流程；
? mRNA疫苗免疫原性分析—ELISA以及其他新型多因子研究方法；
? mRNA疫苗安全性评价及毒性分析-安全性生物标志物检测QuantiGene技术应用；
? mRNA疫苗免疫效力评价--免疫分型研究及相关的流式分析应用。
在讲座中，马老师主要从以下4个方面，跟大家进行了交流：
介绍了mRNA疫苗技术发展历程、基本原理以及整体的开发流程，从而了解和回顾了该领域的研发背景；
对mRNA疫苗开发流程中关于免疫原性以及效力的分析进行了深入讲解；
介绍了在mRNA疫苗安全性评价中的一些重要指标，包括生物标志物以及生物分布分析等；
探讨了如何通过一些新型技术来进一步助力mRNA疫苗的发展。
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答疑环节
1
为什么要在基因表达分析、特别是疫苗质量控制、安全性和生物分布研究方面关注QG分析?
马骏老师：这是因为QuantiGene系列为疫苗的质量控制的发展、安全性的评价和生物分布提供一种非常有效的方法，其成本效益高，可靠性强，而且是一种可扩展的方法。首先它可以实现快速的样本制备，直接从样本到定量检测不需要RNA纯化。其次它可以实现真正的多重分析，在同一个孔里可以检测多达到80个目标RNA的转录本。第三是方法非常灵敏，它基于分支DNA（bDNA）技术可以达到最多8000倍的信号放大，精确的侦测到一些细微的变化，检测出的基因表达的变化范围小于10%。另外，它还可以实现一个标准化的平台，简单的操作流程类似于ELISA以及对多种孔板具有兼容性等。
2
如何评价mRNA疫苗的免疫长效性？要提高长效性有什么方法呢？
马骏老师：免疫的长效性其实是一个综合性的评价，简单来说就是在接种免疫之后可以产生更为持久的免疫应答，比如能够产生更长效的B细胞应答，更持久的抗体滴度或是抗体的半衰期更长，以及固有免疫相关细胞因子也能够持久。另外，如果可以产生更好的免疫记忆效果，用记忆T细胞或者记忆B细胞能够抵御二次侵害的话，也可以认为是一个长效的疫苗。
如何提高免疫长效性是目前大家非常关心的一个问题。首先 mRNA不能在体内过早的被机体降解，这也是mRNA疫苗设计当中的一个关键，比如优化mRNA的UTRs以及结合修饰核苷酸的方法来提高其稳定性、翻译效率以及免疫原性。其次是优化mRNA疫苗的递送方式，包括脂质体纳米颗粒的优化和佐剂的选择等等。另外就是根据具体的免疫机理，选择更加合适的接种方式，这也是可以同时提高其免疫效力和长效性的一个方式。并且现在也有报道指出 mRNA疫苗在淋巴结内进行免疫是一个非常高效的免疫方式。
3
如何发现mRNA疫苗的安全性生物标志物？采用QGP进行生物标志物检测的优势？
马骏老师：其实所谓的安全性生物标志物，换而言之也就是毒性相关的生物标志物。生物标志物的发现一般是在最早期通过将毒性相关的一些动物组织以及细胞进行基因芯片或通过深度基因测序等技术差异筛选出来的。刚才我们的课程中所例举的流感研究，它其实在前期是做过一些相关的标志物选择的工作。目前对于一些常见感染的毒性标志物，也可通过文献或者已有的一些基因数据库来获得。赛默飞提供的Invitrogen ? QuantiGene ? Plex Assay（QGP）对于目前常见的感染性或者肿瘤marker也有一些商用的 panel可以供参考。关于QGP的一个检测优势在于它可以实现一个快速的样本制备，并且从样本到定量检测不需要进行RNA的纯化；可以实现多重分析，也就是多达80个目标的检测；达到高倍数信号放大，并且还可以与Procarta在 Luminex上同时实现蛋白和核酸的检测。更多精彩答疑，尽在课程回顾！温馨提示
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